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Lara A. Fossati, Jennifer A. Larsen, Cecilia Villaverde, Andrea J. Multiplex PCR è stato utilizzato per lo screening del DNA di 10 specie di mammiferi con primer specifici per specie che si annidano in regioni del gene del citocromo b mitocondriale. La quantificazione della contaminazione non è stata determinata in questo studio, precludendo la discriminazione di adulterazione intenzionale da una contaminazione incrociata inevitabile.

Introduzione La reazione avversa al cibo AFR è un termine generale che si riferisce a varie risposte immunologiche allergie alimentari e non immunologiche intolleranza alimentare degli animali a diete o componenti dietetici. La malattia clinica si manifesta tipicamente come dermatosi pruriginosa non stagionale, disturbi gastrointestinali o entrambi.

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Stabilire una diagnosi di AFR in cani e gatti si basa su prove dietetiche ad eliminazione e test di prova. La diagnosi è confermata dalla remissione dei segni clinici sulla dieta di eliminazione, seguita da recrudescenza dei segni mt auburn perdita di peso waltham sulla reintroduzione della dieta precedente.

Esistono varie diete terapeutiche veterinarie formulate con queste strategie. Sono fabbricati in strutture separate o pulite per ridurre al minimo la contaminazione incrociata con altri ingredienti.

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Le diete da banco sono sempre più formulate con ingredienti limitati e non comuni. Inoltre, questi risultati evidenziano una sfida diagnostica e terapeutica per i veterinari che utilizzano queste diete nei cani con AFR. La nostra ipotesi è che il DNA dei mammiferi non dichiarati sia presente nella maggior parte delle diete OTC, ma questo è raro nelle diete terapeutiche veterinarie.

Materiali e metodi Campioni I criteri di inclusione per le diete selezionate per questo studio erano che dovevano essere disponibili in commercio, OTC e veterinari terapeutici, canini, diete secche ottenute da negozi di animali locali e una fonte online in un unico momento tra marzo e aprile Un totale di 29 diete sono state identificate e provenivano solo da un lotto. Idealmente, i campioni sarebbero stati eseguiti in duplicato e da diversi lotti diversi; ma i finanziamenti hanno limitato la nostra capacità di farlo.

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Dopo la presentazione dei campioni al laboratorio, siamo stati successivamente informati che i primer usati per la cacciagione e il coniglio non avrebbero rilevato le specie specifiche di cervo e coniglio tipicamente utilizzate negli alimenti per animali domestici. Pertanto, in questo studio sono state analizzate solo 21 diete OTC. Procedure Il termine di commercializzazione primario o il nome del prodotto sul PDP è stato registrato per ciascuna dieta e classificato come dieta a ingrediente limitato o proteina animale singola o simile verbosità.

Termini di marketing e relativi reclami sono stati ottenuti dai siti Web dei PDP e dei produttori. Solo una dieta è stata aperta alla volta per la raccolta dei campioni, lo spazio di lavoro è stato ripulito tra il campionamento e sono stati utilizzati nuovi guanti sterili per raccogliere ogni campione.

Sono stati pesati circa 5 g di cibo secco e poi riposti in sacchetti di plastica richiudibili singoli non utilizzati. La miscela di primer incorporava tre primer universali fluorescenti etichettati che si ricoprono in regioni altamente conservate del gene del citocromo b mitocondriale Tobe e Linacre. I primer inversi specifici per specie o genere, due per ciascuna specie bersaglio, sono stati inclusi nella miscela di primer con i primer marcati con coloranti per creare un multiplex in grado di rilevare bisonti, gatto, mucca, cervo, cane, capra, cavallo, topo, DNA di ratto, maiale, coniglio e pecora.

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I primer producono frammenti di e bp per bisonte, 98 e bp per gatto, 92 e bp per mucca, 90 e bp per cervo, e bp per cane, e bp per capra, e bp per cavallo, e bp per mouse, e bp per ratto, e bp per maiale, e bp per coniglio, e e bp per pecora. Il controllo negativo è stato eseguito sulla stessa piastra dei campioni ma separati da almeno sei corsie. Consisteva di acqua e tutti i reagenti che erano presenti con i campioni.

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Il controllo positivo era costituito da DNA noto proveniente da tutte le cha yi tè dimagrante specie elencate sopra. Questo è stato eseguito in mt auburn perdita di peso waltham simile al controllo negativo; era sullo stesso piatto dei campioni, separati da almeno sei corsie.

Il controllo positivo è passato se entrambi i segnali sono stati rilevati per ciascuna specie nel test. Statistica Le statistiche descrittive mediana e intervallo sono state calcolate utilizzando un software basato su computer Microsoft Office ExcelMicrosoft Corp.

Risultati Da marzo ad aprile sono state acquistate ventuno diete secche canine OTC; 20 diete sono state acquistate da una fonte online e una dieta da un negozio di animali domestici. Otto diete erano destinate alla manutenzione dei cani adulti, mentre 13 diete erano adeguate per alimentare tutte le fasi della vita secondo le dichiarazioni di adeguatezza nutrizionale Associazione dei funzionari del Controllo dei mangimi americano.

Il numero di termini di marketing e di reclami trovati sui siti web delle aziende era spesso maggiore rispetto al PDP per la stessa dieta.

Ad esempio, tre delle quattro diete con il termine proteina animale singolo sul PDP hanno anche usato il termine ingrediente limitato sul loro rispettivo sito web. Una dieta conteneva due fonti proteiche di origine animale bisonti e uovatuttavia era ancora commercializzata come una dieta a base di ingredienti limitati e quindi soddisfaceva i criteri di inclusione.

Wild Calling! Greely, CO. Dei 21 campioni, 20 erano positivi per la componente di mammifero dichiarato. Solo un campione ha un risultato PCR negativo per la specie dichiarata.

Una dieta che dichiarava solo bisonte era positiva per il DNA di cinque specie bisonte, mucca, capra, maiale e pecora. Il bovino era la specie più spesso rilevata e non dichiarata mediana di 2,5 e il maiale era il contaminante meno comune mediana di 1.

In tutte le diete positive per il DNA di capra, le pecore erano la fonte proteica etichettata ed erano anche positive per il DNA delle pecore. Tutti i campioni positivi per il bisonte erano anche positivi per il DNA della mucca non dichiarata.

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Il DNA di bisonte non è stato rilevato in nessuna delle due diete che hanno dichiarato il bovino come fonte proteica dei mammiferi. Il DNA di bisonte non era mai presente quando non era dichiarato, ma una dieta che dichiarava il bisonte era negativa per questo ingrediente.

Nessun campione è risultato positivo per il DNA di specie di gatto, cane, cavallo, topo e topo. Gli alimenti implicati sono spesso basati sulle percezioni dei proprietari attraverso modifiche dietetiche incontrollate. Le diete per cani da banco sono destinate a sostenere cani sani in varie fasi della vita. A differenza delle diete terapeutiche veterinarie, non sono intese a diagnosticare, trattare o curare un processo patologico, quindi la presenza di DNA di mammifero non dichiarato non è stata inaspettata.

Tuttavia, alcune delle diete OTC valutate in questo studio hanno utilizzato termini quali sensibilità, allergie e pelle e peli sani su etichette o siti Web, che possono implicare o esplicitare il loro uso suggerito nella diagnosi o nel trattamento della AFR. A seconda della formulazione esatta, questi potrebbero essere considerati sinistri di droga, che identificano la dieta come intesa per la diagnosi, la cura, la mitigazione o la prevenzione della malattia e non sono consentiti sulle etichette dietetiche OTC o sulle comunicazioni del produttore inclusi i siti Web direttamente disponibili al consumatore.

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Questo studio è stato in grado di identificare discrepanze tra i risultati dei test della PCR e le dichiarazioni degli ingredienti, con tutte le diete OTC campionate contenenti uno o più frammenti di DNA di mammiferi non dichiarati.

Mt auburn perdita di peso waltham il nostro studio fosse in grado di qualificare la presenza di ingredienti non dichiarati, la quantificazione non era possibile, né la possibile ragione della loro presenza.

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In questo senso, la contaminazione è indicata come inevitabile quando si utilizzano buone pratiche di fabbricazione Associazione dei funzionari americani per il controllo dei mangimi, ed è responsabilità del produttore attuare misure rigorose di controllo della qualità per ridurre al minimo il rischio e il grado di occorrenza.

Un altro motivo di errore di etichettatura è la sostituzione intenzionale con ingredienti alternativi per guadagno economico.

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